犬貓作為人類伴侶動(dòng)物,備受人們喜愛(ài),同時(shí)在疫病方面受到越來(lái)越多的關(guān)注,。犬瘟熱和犬細(xì)小病毒病是犬常見(jiàn)的傳染病,臨床上都表現(xiàn)為高熱,、嘔吐和腹瀉等相似癥狀犬冠狀病毒病是一種急性,、腸炎型傳染病,鑒別診斷與以稀便為主的腸炎疾病相似,尤其區(qū)分輪狀病毒或細(xì)小病毒感染,這些具有相似癥狀的傳染病給診斷帶來(lái)了困擾,。貓杯狀病毒常引起貓科動(dòng)物上呼吸道癥狀和口腔潰瘍,具有較高的感染率,目前還未研制出有效的疫苗,該病原嚴(yán)重威脅貓的健康,。引起貓呼吸道疾病的另一常見(jiàn)病原是皰疹病毒,患病貓常出現(xiàn)發(fā)熱,打噴嚏,鼻,、眼中流出分泌物等臨床癥狀,主要威脅仔貓的健康,發(fā)病率可達(dá)100% ,。貓泛白細(xì)胞減少癥又稱貓瘟熱,是由細(xì)小病毒引起的傳染病,幼貓的感染率和死亡率較高,白細(xì)胞顯著減少是患該病的一個(gè)重要特征。此外,大腸桿菌和結(jié)核分枝桿菌等引發(fā)的細(xì)菌病以及弓形蟲(chóng),、旋毛蟲(chóng),、鉤端螺旋體等寄生蟲(chóng)病,都是威脅犬貓健康的重要病原。其中,部分疫病為人畜共患病,如狂犬病,、弓形蟲(chóng)病和鉤端螺旋體病等,存在病原的跨物種傳播的風(fēng)險(xiǎn),對(duì)人類公眾健康構(gòu)成了重大威脅,。 因此,建立早期快速而準(zhǔn)確的檢測(cè)方法,對(duì)控制犬貓疾病的流行具有重要意義。

盡管病原體的分離和鑒定是診斷的金標(biāo)準(zhǔn),但是某些病原為人畜共患病原體存在安全隱患,因此,在寵物門診和醫(yī)院實(shí)施較為困難,。隨著分子生物學(xué)診斷技術(shù)的進(jìn)步,相關(guān)檢測(cè)技術(shù)不斷優(yōu)化,出現(xiàn)操作簡(jiǎn)單,、靈敏度高、特異性強(qiáng)的新型檢測(cè)技術(shù), 如實(shí)時(shí)熒光定量PCR技術(shù),、等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)和基因芯片等核酸檢測(cè)技術(shù),膠體金免疫層析技術(shù),、時(shí)間分辨熒光免疫層析技術(shù)、熒光微球免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)、化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)和免疫生物傳感器等免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)和基于CRISPR/Cas的核酸檢測(cè)系統(tǒng)等其他新型檢測(cè)技術(shù),可以滿足在多種環(huán)境下快速檢測(cè)病原的需求,本文現(xiàn)針對(duì)犬貓主要病原的新型檢測(cè)技術(shù)的應(yīng)用和研究現(xiàn)狀作以下總結(jié)概述,。

聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（Polymerase chainreation, PCR）技術(shù)主要針對(duì)病原基因組高度保守的序列,將微量的核酸分子進(jìn)行大量擴(kuò)增,是現(xiàn)代應(yīng)用較為廣泛的病原檢測(cè)手段之一,但是也存在缺點(diǎn),需要提取樣品DNA,并且檢測(cè)結(jié)果只能依賴于凝膠電泳的定性分析,。實(shí)時(shí)熒光PCR系統(tǒng)可以滿足定量分析,目前,已經(jīng)建立了貓星狀病毒、犬流感病毒,、犬肝片吸蟲(chóng),、犬鉤蟲(chóng)和犬鉤端螺旋體等多種常見(jiàn)犬貓病原的實(shí)時(shí)熒光定量PCR方法。該技術(shù)是寵物醫(yī)療檢測(cè)平臺(tái)的首選技術(shù),但由于檢測(cè)結(jié)果需要依賴于昂貴的儀器設(shè)備,且對(duì)操作人員有一定要求,所以只能在設(shè)備全面的實(shí)驗(yàn)室中進(jìn)行,。此外,基于PCR反應(yīng)原理,衍生出操作簡(jiǎn)單的等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)和可實(shí)現(xiàn)高通量的基因芯片技術(shù)等,。

1.1環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)

環(huán)介導(dǎo)等溫?cái)U(kuò)增技術(shù)(Loopmediated isothermal amplification,LAMP) 是由日本學(xué)者Notomi等建立的體外恒溫?cái)U(kuò)增核酸的技術(shù),1h之內(nèi)即可對(duì)靶基因進(jìn)行高效擴(kuò)增。

國(guó)內(nèi)外已有利用LAMP技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)的報(bào)道,。關(guān)瑋琨等根據(jù)犬細(xì)小病毒（Canine parvovirus,CPV）VP2基因設(shè)計(jì)引物建立了LAMP方法,最低檢出量為2.1×10^-２TCID₅₀,敏感性是PCR技術(shù)的100倍,在臨床樣品進(jìn)行檢測(cè)中,其與PCR檢測(cè)結(jié)果符合率達(dá)100% ,。目前,已有犬細(xì)小病毒、犬瘟熱病毒和貓泛白細(xì)胞減少癥病毒等LAMP的檢測(cè)方法,該技術(shù)還運(yùn)用到犬馬鞭毛蟲(chóng),、犬帶絳蟲(chóng),、犬孢子蟲(chóng)等多種犬寄生蟲(chóng)病的檢測(cè)。值得注意的是,LAMP技術(shù)已經(jīng)廣泛應(yīng)用于食源性致病菌的檢測(cè),但在犬貓細(xì)菌性疾病檢測(cè)研究較少,。相比于普通PCR,LAMP技術(shù)只需要簡(jiǎn)單的恒溫水浴即可完成對(duì)微量病原的高效擴(kuò)增,但是還未出現(xiàn)檢測(cè)犬貓病原的商品化試劑盒,。該技術(shù)尚有設(shè)計(jì)引物較難的缺點(diǎn),引物之間常存在二聚體結(jié)構(gòu),進(jìn)而導(dǎo)致結(jié)果的假陽(yáng)性。

1.2重組酶聚合酶擴(kuò)增技術(shù)

重組酶聚合酶擴(kuò)增 (Recombinase polymerase amplification, RPA) 是Piepenburg等于2006年研發(fā)出的核酸等溫?cái)U(kuò)增技術(shù),。該技術(shù)主要依賴于多種酶和蛋白參與,通過(guò)模擬DNA體內(nèi)擴(kuò)增,以實(shí)現(xiàn)DNA特定區(qū)域的指數(shù)擴(kuò)增,。

近年來(lái),許多研究工作都報(bào)道了應(yīng)用RPA技術(shù)實(shí)現(xiàn)對(duì)病原快速且靈敏的檢測(cè)。Wang等針對(duì)犬瘟熱病毒核衣殼基因設(shè)計(jì)三種引物和探針,篩選后選出最佳組合,建立RPA快速檢測(cè)方法,該方法與實(shí)時(shí)RT-PCR診斷符合率為100%,但相比之下,RPA方法更加省時(shí)方便,檢測(cè)時(shí)間為3~12min ,。Hu等建立貓冠狀病毒的RPA檢測(cè)方法,在39℃條件下,15min即可特異性檢測(cè)出該病毒的膜基因,最低檢測(cè)限為233拷貝,。目前,已建立起貓皰疹病毒、狂犬病病毒和犬細(xì)小病毒等RPA檢測(cè)方法,結(jié)果均具有較高的靈敏性和特異性,但目前尚未有關(guān)于犬貓病原檢測(cè)的RPA產(chǎn)品完成研發(fā)與上市,。RPA技術(shù)的優(yōu)勢(shì)主要在于體外37~42℃恒溫?cái)U(kuò)增,反應(yīng)時(shí)間只需5~20min,可以實(shí)現(xiàn)及時(shí)準(zhǔn)確的檢測(cè),。該技術(shù)還存在不足,如沒(méi)有專門的軟件設(shè)計(jì)引物和探針,只能通過(guò)消耗大量的時(shí)間和成本,篩選效果良好的引物和探針。此外,RPA擴(kuò)增后需要對(duì)其進(jìn)行純化,否則在瓊脂糖凝膠電泳時(shí)會(huì)導(dǎo)致結(jié)果模糊,。

1.3基因芯片技術(shù)

基因芯片又稱DNA微陣列,基于核酸雜交技術(shù)原理將靶基因固定到固體支持物上,隨后將處理后的樣品與靶基因進(jìn)行特異性結(jié)合,以實(shí)現(xiàn)對(duì)所測(cè)樣品基因的大規(guī)模定量檢驗(yàn),因其高通量的特點(diǎn)而被應(yīng)用于各個(gè)領(lǐng)域,。

基因芯片技術(shù)不僅能區(qū)分多種病原的種屬,甚至可以同時(shí)跨物種檢測(cè),極大的縮短了操作時(shí)間。李健等建立了犬冠狀病毒,、貓冠狀病毒和貓傳染性腹膜炎病毒的三種病毒的基因芯片技術(shù),為病原的快速檢測(cè)提供了便利,。Wu等利用芯片技 術(shù)原理同時(shí)檢測(cè)五種犬病毒,這些病毒包括犬瘟熱、犬細(xì)小病毒,、犬副流感病毒,、犬腺病毒和狂犬病病毒,通過(guò)靶向每種病毒的保守基因組區(qū)域來(lái)實(shí)現(xiàn)測(cè)定特異性,對(duì)臨床75個(gè)樣本進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果顯示與普通PCR技術(shù)檢測(cè)結(jié)果的符合率為100%?；蛐酒瑱z測(cè)病原技術(shù)成功的關(guān)鍵在于提高雜交特異性和降低干擾背景,但其檢測(cè)結(jié)果多依賴于專業(yè)掃描儀器,成本較高,。目前,該技術(shù)在犬貓疫病檢測(cè)方面尚處于實(shí)驗(yàn)研究階段,。

由于病原標(biāo)識(shí)性抗原篩選技術(shù)、單克隆抗體,、多克隆抗體以及重組抗體等生物技術(shù)的快速發(fā)展,使得基于抗原抗體特異性結(jié)合的免疫學(xué)診斷技術(shù),以膠體金作為指示劑的層析技術(shù),可以實(shí)現(xiàn)對(duì)待測(cè) 樣品的直觀快速的檢測(cè),已研究出犬細(xì)小病毒,、犬貓弓形蟲(chóng) 、貓冠狀病毒和貓泛白細(xì)胞減少癥病毒檢測(cè)試紙條,根據(jù)國(guó)家獸藥基礎(chǔ)數(shù)據(jù)庫(kù)查詢可知,目前已有約13種已經(jīng)批準(zhǔn)上市的犬貓膠體金檢測(cè)試紙條,由于操作簡(jiǎn)單,結(jié)果只需肉眼觀察,被寵物醫(yī)院和基層單位的現(xiàn)場(chǎng)廣泛使用,但膠體金免疫層析試紙條檢測(cè)病原只能定性或是半定量,且準(zhǔn)確性低于PCR技術(shù),。在此基礎(chǔ)上,新的免疫學(xué)檢測(cè)技術(shù)相繼出現(xiàn),如時(shí)間分辨免疫分析技術(shù),、免疫微球檢測(cè)技術(shù)、化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)和免疫生物傳感器等,。

2.1時(shí)間分辨免疫熒光層析技術(shù)

時(shí)間分辨免疫熒光層析技術(shù)(Time-resolved immunochromatographic fluorescent assay,TRIFA)是基于免疫層析和時(shí)間分辨熒光分析相結(jié)合的定量檢測(cè)技術(shù),利用熒光的鑭系元素或稀土粒子標(biāo)記抗原或抗體,使抗原抗體在硝酸纖維膜上發(fā)生反應(yīng),用簡(jiǎn)單配套的設(shè)備來(lái)測(cè)定熒光強(qiáng)度,從而實(shí)現(xiàn)定量分析待測(cè)樣本中的濃度,。

TRIFA技術(shù)的主要標(biāo)記物為鑭系元素,因其特殊的發(fā)光特性可以有效減低外界熒光和非特異性熒光的干擾,增強(qiáng)檢測(cè)的靈敏度。Chen等將犬細(xì)小病毒抗體與銪(Eu³⁺) 偶聯(lián)標(biāo)記,建立雙抗體夾心式的時(shí)間分辨免疫層析技術(shù)以檢測(cè)犬細(xì)小病 毒的含量,靈敏度達(dá)1.15mEu/mL,。韓陽(yáng)瑞等建立了檢測(cè)弓形蟲(chóng)感染的血清中抗體的時(shí)間分辨免疫層析技術(shù),結(jié)果通過(guò)統(tǒng)計(jì)學(xué)的分析,顯示該方法與ELISA之間具有較好的一致性,且具有足夠的精度,、分析靈敏度和準(zhǔn)確度。我國(guó)已有研究人員基于TRIFA技術(shù)對(duì)犬冠狀病毒和貓杯狀病毒實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè),但未有針對(duì)犬貓病原檢測(cè)的商品用試劑盒,。該技術(shù)既保留了膠體金免疫層析技術(shù)的反應(yīng)快速,、操作簡(jiǎn)單的特點(diǎn),通過(guò)熒光技術(shù)實(shí)現(xiàn)了對(duì)試驗(yàn)結(jié)果的定量分析,但是實(shí)驗(yàn)結(jié)果的熒光信號(hào)需依賴于配套的儀器設(shè)備。

2.2免疫微球分離檢測(cè)技術(shù)

免疫微球分離技術(shù)(Immunomagnetic beads separation technology,IMBS）是將磁珠的磁性,、響應(yīng)性和抗原抗體的特異性反應(yīng)相結(jié)合的一項(xiàng)技術(shù),將特異性抗原(或抗體)偶聯(lián)在磁性微球表面,從而與待檢樣品的抗體(或抗原)特異性結(jié)合,達(dá)到分離濃縮的目的,。

IMBS主要與其他檢測(cè)技術(shù)相結(jié)合以避免樣品中的其他成分對(duì)檢測(cè)的干擾,使檢測(cè)結(jié)果更加高效、特異,。唐毓等利用表達(dá)并純化的犬細(xì)小病毒中VP2基因的重組蛋白作為抗原與納米微球偶聯(lián),建立了一種快速檢測(cè)犬細(xì)小病毒抗體的間接凝 集方法,對(duì)臨床40份犬血清進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果顯示,不僅檢測(cè)時(shí)間比ELISA用時(shí)短,而且與ELISA檢測(cè)方法的符合率達(dá)97%,。Chen等將磁珠免疫微球技術(shù)和化學(xué)發(fā)光層析技術(shù)相結(jié)合建立檢測(cè)犬血 清中的犬細(xì)小病毒抗體的方法,1h通過(guò)采集光度即可分析結(jié)果,可運(yùn)用該方法定量檢測(cè)犬細(xì)小病毒抗體的濃度和疫苗免疫效果的評(píng)價(jià),。相較于傳統(tǒng)的免疫學(xué)診斷技術(shù),，該技術(shù)可實(shí)現(xiàn)免疫分離與微量富集結(jié)合為一體,降低非特異性結(jié)合可能性,使檢測(cè)結(jié)果更加高效、特異,。使用IMBS進(jìn)行高效富集的關(guān)鍵在于抗體的特異性和敏感性,但是受到樣品基質(zhì)的復(fù)雜性生物干擾,因此,IMBS的應(yīng)用性能還需要進(jìn)一步研究,。

2.3化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)

化學(xué)發(fā)光免疫分析技術(shù)(Chemiluminescence immunoassay,CLIA)是以化學(xué)發(fā)光相關(guān)物質(zhì)為示蹤信號(hào)標(biāo)記抗原(或抗體), 利用抗原抗體特異性結(jié)合的原理，通過(guò)化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度對(duì)待測(cè)物定量分析,。由于發(fā)光強(qiáng)度與待測(cè)物的濃度呈正相關(guān),可以通過(guò)儀器測(cè)定發(fā)光強(qiáng)度,便可對(duì)待測(cè)物進(jìn)行定量分析,。

吖啶酯是常見(jiàn)的化學(xué)發(fā)光物質(zhì),其發(fā)光效率在1s內(nèi)即可完成,成本低,適合各種檢測(cè)機(jī)構(gòu)使用。Gasior等將吖啶酯與二抗(IgG)和SAG2-GRA1-ROP1L嵌合抗原連接起來(lái),，建立檢測(cè)血清中弓形蟲(chóng)特異性抗體的化學(xué)發(fā)光免疫分析方法,以ROC曲線來(lái)分析的IgG CLIA與IgG ELISA測(cè)定的診斷價(jià)值,，使用相同用量的二抗測(cè)得AUC(ROC曲線下的面積)的結(jié)果分別是0.966和0.985,結(jié)果表明,IgG CLIA比IgG ELISA的檢測(cè)結(jié)果更加敏感。Chen等利用犬細(xì)小病毒重組蛋白為包被抗原,以吖啶酯標(biāo)記二抗,建立檢測(cè)犬細(xì)小病毒抗體的CLIA檢測(cè)方法,1h后即可收集化學(xué)發(fā)光強(qiáng)度,檢測(cè)限為0.36ng/mL,。楊富強(qiáng)等利用堿性酶對(duì)犬瘟熱病毒抗原進(jìn)行標(biāo)記,以吖啶酯類作為發(fā)光底物,設(shè)計(jì)并發(fā)明檢測(cè)犬瘟熱病毒抗體,。該方法具有即時(shí) 診斷特點(diǎn),37℃孵育半小時(shí)即可。其在靈敏度,、穩(wěn)定性和檢測(cè)效率上明顯優(yōu)于ELISA測(cè)定方法,。雖然該技術(shù)目前在犬貓病原檢測(cè)方面未有面向市場(chǎng)的產(chǎn)品,，但在2021年完成了第一個(gè)動(dòng)物用化學(xué)發(fā)光試劑盒的審批注冊(cè),該技術(shù)不需要外界的激發(fā)光源,降低了背景的熒光信號(hào),可以在較寬的線性范圍檢測(cè)極低濃度的樣品,具有較高的敏感性,但是其檢測(cè)結(jié)果依賴于專業(yè)的實(shí)驗(yàn)設(shè)備和對(duì)操作人員具有一定的要求,因此,在基層推廣還是有一定限制。

2.4 免疫生物傳感器

生物傳感器是分子生物學(xué),、電化學(xué),、微生物學(xué)等多學(xué)科相互滲透的新型技術(shù),由分子識(shí)別元件即敏感元件(如酶、抗原,、細(xì)胞器,、核酸、細(xì)胞受體,、生物膜等)和信號(hào)轉(zhuǎn)換器(如半導(dǎo)體,、光電轉(zhuǎn)換、熱敏電阻,、壓電晶體等)組成,可以與靶標(biāo)物質(zhì)發(fā)生生化反應(yīng)并且將其濃度轉(zhuǎn)換為可測(cè)量的電信號(hào)或光信號(hào),達(dá)到定量定性分析的目的,。

生物傳感器的種類眾多,其中免疫生物傳感器在病原檢測(cè)方面是可靠手段,具有特異性、長(zhǎng)期穩(wěn)定性,、快速反應(yīng)性等特點(diǎn),。Jiang等先將硫氨酸在nafion-石墨烯修飾的電極上電聚合形成生物敏感膜,在膜上固定弓形蟲(chóng)特異性抗原,基于雙抗體夾心法的原理,構(gòu)建了一種用于檢測(cè)弓形蟲(chóng)特異性IgM的新型電化學(xué)免疫傳感器,結(jié)果表明,電流與IgM濃度具有正相關(guān)性,檢測(cè)限為0.016AU/mL(S/N=3)。Kim等設(shè)計(jì)出檢測(cè)犬細(xì)小病毒的石英晶體微天平生物傳感器,將特定抗體嵌合在金涂層的石英晶體表面,通過(guò)抗原抗體相結(jié)合的頻率變化以檢測(cè)犬細(xì)小病毒的含量,。該生物傳感器具有納米級(jí)的敏感度,通過(guò)對(duì)臨床261份糞便樣本分析,結(jié)果顯示,與PCR相比,具有95.4％的敏感度和98％的特異性,。基于免疫學(xué)的生物傳感器技術(shù)具有特異,、靈敏,、快速的優(yōu)勢(shì),但是也存在缺點(diǎn),如抗體結(jié)合到生物傳感器易失活,穩(wěn)定性較差；非特異性吸附會(huì)影響結(jié)果的準(zhǔn)確性等,。目前針對(duì)犬貓病原檢測(cè)的免疫生物傳感器方法仍停留在科研實(shí)驗(yàn)室階段,，還未出現(xiàn)可應(yīng)用的商品。

成簇規(guī)律間隔的短回文重復(fù)序列(Clustered regularly interspaced short palindromic repeats,CRISPR)以及相關(guān)蛋白（CRISPR-associated protein,Cas）組成的CRISPR/Cas系統(tǒng)是廣泛存在于古細(xì)菌和細(xì)菌中的獲得性免疫系統(tǒng),用于抵御外來(lái)病毒的入侵,。由于CRISPR/Cas系統(tǒng)具有較高特異性和靈敏度,可作為新型的核酸檢測(cè)平臺(tái),其中Cas蛋白作為高特異性的序列識(shí)別靶標(biāo)元件,可以與信號(hào)讀取方法相結(jié)合,進(jìn)行核酸的定量檢測(cè),。

基于CRISPR/Cas系統(tǒng)的核酸檢測(cè)方法主要由三個(gè)步驟構(gòu)成,包括核酸擴(kuò)增、特異性核酸序列識(shí)別以及檢測(cè)結(jié)果讀取,。Khan等將重組酶介導(dǎo)的擴(kuò)增技術(shù)與CRISPR/Cas13a檢測(cè)系統(tǒng)相結(jié)合,建立快速,、特異檢測(cè)犬細(xì)小病毒的熒光報(bào)告系統(tǒng),該系統(tǒng)可在30min內(nèi)檢測(cè)到100amol/LCPV-2DNA。該方法具有較高的特異性,通過(guò)與其他犬類病毒(犬瘟熱病毒,、犬冠狀病毒,、犬副流感病毒)進(jìn)行檢測(cè),結(jié)果顯示,犬細(xì)小病毒的平均熒光值顯著更高。CRISPR/Cas系統(tǒng)可以與熒光信號(hào),、免疫層析試紙條等方法相結(jié)合,便可實(shí)現(xiàn)現(xiàn)場(chǎng)操作,可在寵物醫(yī)院和大型養(yǎng)殖場(chǎng)推廣使用,。但該技術(shù)還存在缺點(diǎn)：如脫靶效應(yīng),可能會(huì)在檢測(cè)過(guò)程中出現(xiàn)假陽(yáng)性的結(jié)果；RNA 酶廣泛存在,可能會(huì)使CRISPR檢測(cè)體系的重要組分向?qū)NA被降解,影響檢測(cè) 結(jié)果的穩(wěn)定性,。目前該系統(tǒng)在人類疾病領(lǐng)域出現(xiàn)商品化診斷試劑,但在犬貓病原檢測(cè)研究尚少,。

近年來(lái),各種新型檢測(cè)技術(shù)在準(zhǔn)確度,、靈敏度及操作時(shí)間都有跨越式發(fā)展,但大多數(shù)的核酸檢測(cè)技術(shù)依賴精密甚至昂貴的儀器設(shè)備和專業(yè)的操作人員,不能在基層大規(guī)模普及。鑒于熒光檢測(cè)系統(tǒng)和側(cè)向流動(dòng)分析技術(shù)可提供一個(gè)簡(jiǎn)單的可視化結(jié)果分析,因此可以考慮將多個(gè)技術(shù)聯(lián)合使用,發(fā)揮各技術(shù)的優(yōu)勢(shì),從而實(shí)現(xiàn)優(yōu)勢(shì)互補(bǔ)以實(shí)現(xiàn)快速,、敏感的檢測(cè),。在免疫檢測(cè)技術(shù)中,標(biāo)記物是影響靈敏度和檢測(cè)效率的重要因素,與傳統(tǒng)的基于金納米顆粒標(biāo)記相比,使用彩色微球、量子化,、鑭系元素和膠體碳等新型材料標(biāo)記可以進(jìn)一步提高靈敏度和檢測(cè)效率,可能使得免疫層析技術(shù)更快速,、靈敏、準(zhǔn)確,在犬貓病原檢測(cè)方面具有良好的應(yīng)用前景,。尤其是近年來(lái),成熟應(yīng)用于人類臨床醫(yī)學(xué)的化學(xué)發(fā)光免疫層析技術(shù),已開(kāi)始在動(dòng)物疫病檢測(cè)方面從研究走向市場(chǎng),未來(lái)就需要有條件的企業(yè)或科研平臺(tái)加大科研投入,以促進(jìn)成果轉(zhuǎn)化,相信在犬貓病原檢測(cè)方面將會(huì)有巨大的市場(chǎng),。

隨著科技學(xué)技術(shù)的發(fā)展,檢測(cè)的智能化、數(shù)字化和便攜化趨勢(shì)越來(lái)越明顯,快速,、高效,、準(zhǔn)確的快速檢測(cè)方法是犬貓等動(dòng)物檢測(cè)的發(fā)展趨勢(shì)。人工智能提供了一個(gè)準(zhǔn)確分析數(shù)據(jù)的平臺(tái),高分辨率的攝像頭和精確的計(jì)算能力,可彌補(bǔ)目測(cè)帶來(lái)的不準(zhǔn)確性,實(shí)現(xiàn)對(duì)病原含量客觀,、精準(zhǔn)的閱讀,減少操作人員的主觀錯(cuò)誤判斷,。

同時(shí),多種病原同步檢測(cè)技術(shù)也是臨床檢測(cè)的發(fā)展趨勢(shì),尤其是對(duì)于處于潛伏期感染的動(dòng)物,需要在疾病發(fā)生早期進(jìn)行病原篩查,這就需要實(shí)現(xiàn)多種病原的多重?cái)U(kuò)增,對(duì)寵物病原來(lái)講,目前仍然是一個(gè)挑戰(zhàn)。

未來(lái),犬貓等寵物病原檢測(cè)技術(shù)會(huì)朝著多種檢測(cè)技術(shù)互相融合,、高通量,、高靈敏度、高準(zhǔn)確度,、快速檢測(cè),、可普及推廣及可商品化的方向發(fā)展,以便滿足在不同檢測(cè)環(huán)境下的快速檢測(cè),為犬貓的健康和公共生物安全保駕護(hù)航。