提升產(chǎn)業(yè)技術(shù)創(chuàng)新能力促進(jìn)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)優(yōu)化升級國家獸藥產(chǎn)業(yè)技術(shù)創(chuàng)新聯(lián)盟致力于建立產(chǎn)業(yè)技術(shù)發(fā)展信息交流平臺,收集了解產(chǎn)業(yè)技術(shù)創(chuàng)新過程中的需求,為聯(lián)盟成員單位提供技術(shù),、產(chǎn)品,、人力資源和信息、咨詢,、培訓(xùn)等綜合服務(wù);受企業(yè)委托,對科技成果的技術(shù)水平和產(chǎn)業(yè)化前景進(jìn)行評估,;定期舉辦獸藥行業(yè)技術(shù)創(chuàng)新論壇,加強(qiáng)成員單位間的信息交流,提出切實(shí)建議,,凝聚產(chǎn)業(yè)共識,,積極為國家政策獻(xiàn)言獻(xiàn)策,引導(dǎo)行業(yè)健康發(fā)展,。為此,,聯(lián)盟微信公眾號設(shè)立《新技術(shù)&研究進(jìn)展》欄目,收集,、發(fā)布獸藥產(chǎn)業(yè)相關(guān)技術(shù)創(chuàng)新及研究進(jìn)展,,本期介紹華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動科動醫(yī)學(xué)院何啟蓋教授團(tuán)隊(duì)發(fā)表的“TurboID Screening of the OmpP2 Protein Reveals Host Proteins Involved in Recognition and Phagocytosis of Glaesserella parasuisby iPAM Cells”。
近日,,國際學(xué)術(shù)期刊Microbiology Spectrum在線發(fā)表了華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動科動醫(yī)學(xué)院何啟蓋教授團(tuán)隊(duì)題為“TurboID Screening of the OmpP2 Protein Reveals Host Proteins Involved in Recognition and Phagocytosis of Glaesserella parasuisby iPAM Cells”的研究論文,。該研究通過TurboID鄰近標(biāo)記技術(shù),揭示了豬格拉瑟氏菌OmpP2蛋白與宿主細(xì)胞的互作蛋白質(zhì)組,,并通過過表達(dá)和siRNA干擾技術(shù)證實(shí)宿主細(xì)胞膜蛋白CAV1,、ARF6和PPP2R1A參與iPAM細(xì)胞對豬格拉瑟氏菌的識別與吞噬。該研究從宿主的角度揭示了豬格拉瑟氏菌入侵宿主細(xì)胞的關(guān)鍵蛋白,,進(jìn)一步闡明了豬格拉瑟病的致病機(jī)理,,為治療和防控提供了新的思路。豬格拉瑟氏菌是定植于豬上呼吸道的一種常在菌,,但在特定的條件下,,例如豬群應(yīng)激、免疫力低下或者伴隨其他病原混合感染時(shí),,該菌可以侵入機(jī)體各系統(tǒng)組織,,引起以纖維素性多發(fā)性漿膜炎、關(guān)節(jié)炎和腦膜炎為臨床特征的革拉瑟氏病,。何啟蓋教授團(tuán)隊(duì)多年來一直專注于豬格拉瑟氏菌的致病機(jī)制研究,。TurboID為生物素連接酶,其在游離生物素存在的條件下,,可將10nm范圍內(nèi)的蛋白質(zhì)進(jìn)行生物素標(biāo)記,,之后通過鏈霉素親和磁珠對生物素化的蛋白進(jìn)行捕獲及進(jìn)行質(zhì)譜鑒定,可得到與目標(biāo)蛋白互作的蛋白質(zhì)組,。本研究通過將豬格拉瑟氏菌外膜蛋白OmpP2與TurboID融合表達(dá),,并將重組蛋白與iPAM細(xì)胞互作,共鑒定到240個(gè)與OmpP2互作的宿主蛋白,,其中包含四個(gè)膜蛋白(CAV1,、ARF6、PPP2R1A和AP2M1),。利用過表達(dá)和siRNA干擾技術(shù)證明CAV1,、ARF6和PPP2R1A參與iPAM細(xì)胞對豬格拉瑟氏菌的識別和吞噬,。本研究表明,TurboID鄰近標(biāo)記技術(shù)是研究病原菌與宿主蛋白互作的有力工具,。圖1. TurboID鄰近標(biāo)記技術(shù)示意圖
圖2.質(zhì)譜鑒定結(jié)果
華中農(nóng)業(yè)大學(xué)動科動醫(yī)學(xué)院博士生江昌盛為論文第一作者,,李文濤教授和何啟蓋教授為論文通訊作者。該研究得到了財(cái)政部和農(nóng)業(yè)農(nóng)村部:國家現(xiàn)代農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系資助(CARS-35)的資助,。https://journals.asm.org/doi/full/10.1128/spectrum.02307-22
編輯:周盼伊
審核:劉業(yè)兵
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