豬δ冠狀病毒（Porcine deltacoronavirus, PDCoV）是近幾年新發(fā)現(xiàn)的豬腸道冠狀病毒,，主要引起新生仔豬的嘔吐、腹瀉,、脫水甚至死亡,，該病原可感染所有日齡的豬,，對初生仔豬危害最為嚴(yán)重，死亡率為50%左右,，給養(yǎng)豬業(yè)帶來巨大經(jīng)濟(jì)損失,，但是目前國內(nèi)外尚無批準(zhǔn)的商品化疫苗。因此,，研發(fā)豬δ冠狀病毒疫苗是當(dāng)前疫病防控的當(dāng)務(wù)之急,。

 近日，獸醫(yī)所李彬研究員團(tuán)隊(duì)在PDCoV新型亞單位疫苗研制方面取得重要進(jìn)展,，相關(guān)研究以題為“A novel recombinant S-based subunit vaccine induces protective immunity against porcine deltacoronavirus challenge in piglets”在線發(fā)表于病毒學(xué)國際權(quán)威期刊《Journal of Virology》（一區(qū),，TOP期刊）上,，該研究設(shè)計和研究了基于PDCoV S蛋白的新型亞單位疫苗，其在主動免疫和被動免疫保護(hù)方面均取得較好的免疫保護(hù)效果,。

研究人員通過設(shè)計和優(yōu)化基因序列,，用桿狀病毒表達(dá)系統(tǒng)分別表達(dá)了PDCoV S和RBD蛋白，證實(shí)這兩種蛋白均以三聚體形式表達(dá),。將純化的蛋白分別與Gel 01佐劑和新研發(fā)的M103佐劑乳化制備成疫苗,，免疫小鼠后檢測IgG和中和抗體，分析淋巴細(xì)胞增殖指數(shù),、CD3+CD4+ T淋巴細(xì)胞亞型,、CD3+CD8+ T淋巴細(xì)胞亞型、B淋巴細(xì)胞和NK細(xì)胞等,，發(fā)現(xiàn)S+M103疫苗組誘導(dǎo)的免疫應(yīng)答水平高于RBD亞單位疫苗和PDCoV滅活疫苗,。

隨后，研究人員將S+M103疫苗免疫5日齡仔豬,，開展疫苗的主動免疫保護(hù)試驗(yàn)研究,。結(jié)果發(fā)現(xiàn)S蛋白亞單位疫苗組和PDCoV滅活疫苗組攻毒前中和抗體均達(dá)1：64以上，細(xì)胞因子IL-4和IFN-γ表達(dá)水平顯著提升,。攻毒后發(fā)現(xiàn),，S亞單位免疫組和PDCoV滅活疫苗僅1頭仔豬發(fā)生輕微腹瀉，攻毒對照組5頭仔豬均發(fā)生持續(xù)性嚴(yán)重腹瀉,；免疫組肛拭子排毒,、腸道組織病毒載量、剖檢病變和顯微病變均顯著低于攻毒對照組（P＜0.05）,。免疫持續(xù)期試驗(yàn)結(jié)果顯示,，亞單位疫苗免疫后4個月后仔豬的中和抗體仍可達(dá)1：16左右。結(jié)果表明新型PDCoV S蛋白亞單位疫苗免疫仔豬能產(chǎn)生較好的主動免疫保護(hù),，抵御PDCoV感染,。

PDCoV臨床上主要危害新生仔豬，為了證實(shí)新型PDCoV S蛋白亞單位疫苗的被動免疫保護(hù)效果,，研究人員將該亞單位疫苗免疫懷孕母豬,，新生仔豬吸食5天母乳后攻毒，同時也免疫PDCoV滅活疫苗做為陽性對照,、免疫PBS做陰性對照,。通過檢測母乳和血清的中和抗體發(fā)現(xiàn)，仔豬出生當(dāng)天母乳/血清中和抗體最高,，分別達(dá)1：128和1：256以上,，隨后逐漸降低，同時母乳中檢測到高水平的IgA抗體,。仔豬攻毒后發(fā)現(xiàn),，S亞單位疫苗免疫組無仔豬腹瀉，PDCoV滅活疫苗有2頭仔豬發(fā)生輕微腹瀉,，攻毒對照組5頭仔豬均發(fā)生持續(xù)性嚴(yán)重腹瀉,；免疫組肛拭子排毒水平、腸道組織病毒載量,、剖檢病變和顯微病變均顯著低于攻毒對照組（P＜0.05）,。綜上所述，本研究研制的新型PDCoV S蛋白亞單位疫苗具有較好的主動免疫和被動免疫保護(hù)效果,，可作為預(yù)防控制PDCoV的候選疫苗,。

獸醫(yī)所動物腹瀉病防控創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)李基棕副研究員、聯(lián)合培養(yǎng)（南京工業(yè)大學(xué)）碩士研究生趙淑慶和張寶太為論文共同第一作者,，團(tuán)隊(duì)首席李彬研究員和南京工業(yè)大學(xué)任麗莉教授為論文共同通訊作者,。該研究得到了十四五重點(diǎn)研發(fā)計劃、國家自然科學(xué)基金和江蘇省自然科學(xué)基金等項(xiàng)目的資助,。

文章鏈接：https://journals.asm.org/doi/10.1128/jvi.00958-23